ISRE-Luc/Raw264.7
CBP74098
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| I. Background | |
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干扰素（IFN）是一种由单核细胞和淋巴细胞产生的具有多种功能的可溶性糖蛋白，是先天和适应性免疫的关键效应分子。IFN 细胞因子根据其结合的不同干扰素受体分为三种类型：I 型、II 型和 III 型。Ⅰ型干扰素的分类较多，包括 IFN-α、IFN-β、IFN-δ、IFN-κ、IFN-ω、IFN-τ、IFN-ε、IFN-ξ 等；Ⅱ型干扰素为 IFN-γ；Ⅲ型干扰素即 IFN-λ，包括IFN-λ1、IFN-λ2 及 IFN-λ3。Ⅰ型干扰素主要功能是抗病毒及抗肿瘤，Ⅱ型干扰素主要功能是诱导主要组织相容性复合体（MHC）类抗原的表达和免疫调节效应，但其抗病毒作用比Ⅰ型干扰素弱。Ⅲ型 INF 为 2003 年发现的一种新型干扰素，具有广谱的抗病毒及免疫调节活性。
配体结合后，I 型和 II 型受体均被激活，导致受体亚基二聚化和重排，从而通过自身磷酸化激活相关 JAK，并进一步激活 STAT 蛋白。磷酸化后，激活的 STAT 形成同型二聚体，然后转位到细胞核中，在那里启动 IFN 刺激基因的转录。
I 型干扰素还可诱导 ISGF3 复合物的形成，该复合物由 STAT1、STAT2 和 IRF9 组成。ISGF3 复合物与 ISRE（干扰素刺激反应元件）结合，进一步诱导启动子内含有 ISRE 的干扰素刺激基因的转录。
IFNγ 与 IFNγ 受体结合导致下游 STAT1 在 Tyr701 位点发生酪氨酸磷酸化。产生磷酸化的 STAT1 同型二聚体转位至细胞核并与 GAS（IFNγ 激活位点）元件结合，从而诱导 IFNγ 调控基因的表达。
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| II. Description | |
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ISRE-Luc RAW264.7 报告基因细胞是由 ISRE 调控并表达 Luc 荧光素 酶报告基因的 RAW264.7细胞。RAW264.7 是小鼠巨噬细胞的常用模型，用于研究细胞对微 生物及其产物的反应。RAW 264.7 衍生细胞内源性表达许多 PRR，包括 toll 样受体 （TLR）、 NOD 样受体 （NLR）、RIG-I 样受体 （RLR） 和 C 型凝集素受体 （CLR）。STING 激活的 原理见下图所示。
 Figure 1：ISRE-Luc/Raw264.7细胞模型原理图 |
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| III. Introduction | |
| Host Cell: | Raw264.7 |
| Expressed gene: | ISRE |
| Stability: | 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.) |
| Freeze Medium: | 90% FBS+10% DMSO |
| Culture Medium: | DMEM+10%Heat Inactivated-FBS+200 μg/ml Zeocin+100 μg/ml Normocin |
| Mycoplasma Testing: | Negative |
| Storage: | Liquid nitrogen |
| Application(s): | Functional(Report Gene) Assay |
| IV.. Description of Host Cell Line | |
| Organism: | Mus musculus, mouse |
| Tissue: | Abelson murine leukemia virus-induced tumor; ascites |
| Disease: | Abelson murine leukemia virus-induced tumor |
| Morphology: | Monocyte/macrophage |
| Growth Properties: | Adherent |
| V. Representative Data | |
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Figure 2. Detect Luciferase assay by Ultra Luciferase Detection Kit CBPH0001（we strongly suggest to purchase from Cobioer). Dose Response of 2'3-cGAMP in ISRE-Luc RAW264.7(C1). |
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