CTR&RAMP1 CRE-Luc HEK293
CBP71497
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| I. Background | |
| 降钙素基因相关肽（CGRP）家族包括 CGRP 本身、降钙素（CT）、肾上腺髓质素 （AM）和胰岛淀粉样肽（AMY）。 胰淀素（Amylin）受体的三种类型的已被确定，即 AMY1，AMY2 和 AMY3。胰淀素 受体属于 B 类 GPCR，是异二聚体复合物，由降钙素受体（CTR）与受体活性修饰蛋白 （RAMPs）结合形成。该受体的 CTR 组分具有相同的 GPCR 结构：7 个跨膜相互连接的α- 螺旋，将细胞外信号传递到细胞内细胞质信号级联。RAMP 有三种类型（RAMP1、 RAMP2 和 RAMP3），它们共享 31%的氨基酸序列，具有相似的基本结构。RAMP 是将 CTR 转运到细胞膜并调节其配体特异性的重要肽，它可以改变特定 GPCR 的药理学、功能 和细胞运输。 哺乳动物细胞中 Amylin 受体的激活已被证明可以提高 cAMP，并被认为与 Gs 蛋白和 腺苷酸环化酶的刺激有关。在 RAMPs 的存在下，其与胰淀素的结合亲和力可以被修饰。 CTR 和 RAMP1 或 CTR 和 RAMP3 的异质结构被认为有利于与胰淀素结合，介导大脑中的 生理功能。AMY3 的激活刺激 G 蛋白 Gαs，进一步控制腺苷酸环化酶（AC），随后增加细 胞 cAMP。cAMP 与 PKA 调控亚基（R2）的结合诱导 PKA 四聚体全酶解离，导致 PKA 催 化亚基的激活。cAMP 激活的 PKA 参与调控 ERK1/2 的活性。ERK1/2 通路的触发可能导致 Ca 2+分布不均匀，引发内质网和线粒体功能障碍，导致细胞死亡。此外，cAMP 刺激 AKT 进一步导致转录因子 cFos 的表达。 | |
| II. Description | |
CTR&RAMP1 CRE-Luc HEK293 报告基因药靶模型很好的模拟了体内 CTR&RAMP1 的信号转导过程，原理见下图所示。 Figure 1. CTR&RAMP1 CRE-Luc HEK293 细胞模型原理图 |
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| III. Introduction | |
| Host Cell: |
HEK293 |
| Stability: | 20 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.) |
| Freeze Medium: | 90% FBS+10% DMSO |
| Culture Medium: | DMEM + 10%FBS + 100 μg/ml Hygromycin B + 2 μg/ml Puromycin + 10 μg/ml Blasticidin |
| Mycoplasma Status: | Negative |
| Storage: | Liquid nitrogen immediately upon delivery |
| Application(s): |
Functional assay for CTR/RAMP1 |
| Transducer: | Gs |
| IV. Description of Host Cell Line | |
| Organism: | Human |
| Tissue: | kidney |
| Morphology: | Epithelial |
| Growth Properties: | Adherent |
V. Representative Data Figure 2. WB of CTR&RAMP1 CRE-Luc HEK293.  Figure 3. Recombinant CTR&RAMP1 CRE-Luc HEK293 stably expressing CTR&RAMP1.  Figure 4. Detect Luciferase assay by Ultra Luciferase Detection Kit CBPH0001（we strongly suggest to purchase from Cobioer). Dose Response of CTR/RAMP1 Agonists in CTR&RAMP1 CRE-Luc HEK293 (C29).
Figure 5. HTRF cAMP Assay with CTR&RAMP1 CRE-Luc HEK293 (C29). |
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