Luminescent Cell Viability Detection Kit

CBPH0004

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Luminescent Cell Viability Detection Kit

Luminescent Cell Viability Detection Kit 是通过对 ATP 进行定量来测定培养物中活细胞数目的一种快速均质检测方法。ATP 是活细胞新陈代谢的关键指标。与传统的 MTT 比色法不同，这种基于高灵敏度生物发光方法的检测技术，不受化合物自发荧光的影响，极大的压缩了操作时间和提高了检测的灵敏度。

ATP生物发光技术原理：荧光素酶以荧光素、三磷酸腺苷(ATP)和O2为底物，在Mg2+存在时，将化学能转化为光能。发光值与ATP量成正比，而ATP又和活细胞数正相关，因此可通过检测ATP含量得细胞活力。

Figure 1. ATP生物发光技术原理

产品组分

货号	CBPH0004-1	CBPH0004-2	CBPH0004-3	CBPH0004-4
规格	100 points	1000 points	5000 points	10000 points
组分	1 bottle 10 mL/bottle	1 bottle 100 mL/bottle	5×CBPH0004-2	10×CBPH0004-2

数据展示

1.发光强度

Figure 2. 不同细胞发光强度的检测。各种细胞细胞数在3-6万。

2. 半衰期

Figure 3. 生物发光稳定性的检测。分别使用Luminescent Cell Viability Detection Kit和进口P公司同类对照对2万个/孔CTLL-2细胞（左图）和5万个/孔UC-MSC细胞（右图）进行持续3小时的生物发光强度检测。

3. 线性

Figure 4. 比较不同细胞数的线性范围。分别使用Luminescent Cell Viability Detection Kit和进口P公司同类对照检测不同数量CHO-K1细胞（CD-CHO培养基）在黑色96孔板中生物发光强度，制成标准曲线。

4. 减半使用

Raji细胞	Luminescent Cell Viability Detection Kit	进口P品牌	国产V品牌	国产R品牌
正常添加（100μL试剂+100μL细胞）	63881	46128	46089	46032
半量添加（50μL试剂+100μL细胞）	86513	58588	60229	65135

5. 实际应用——肿瘤药物筛选

Figure 5. 分别用Luminescent Cell Viability Detection Kit和进口P公司产品检测阿霉素杀伤SW620细胞的IC50。

Figure 6. 分别用Luminescent Cell Viability Detection Kit、进口P公司和国产R品牌产品检测顺铂杀伤SK-OV-3细胞的IC50情况。

Protocol

1.检测试剂的准备
使用前将本品在4 ℃或室温下融化。（请勿在超25℃以上进行融化，避免活性减弱）
试剂平衡至室温后，轻柔颠倒混匀试剂。

2.细胞活力检测
·检测试剂和测试细胞样本，室温放置30min，平衡至室温。
·向测试细胞样本中加入等体积的检测试剂。
·96孔板检测体系，100 μL培养基中加入100 μL检测试剂。
·在测量前1200转震荡5分钟，充分震荡会使效果更好。
·室温放置10 min以稳定发光信号，即可进行检测。

3. Notes
·96孔板细胞培养体系中，100 μL/孔细胞与等体积的该试剂反应，总体积为 200 μL。
·避免多次反复冻融。

Product Information　

Intended Use	Research Use Only
Unit Size	100 points/1000 points/5000 points/10000 points
Storage	-80℃~-20℃
Expiry	12 months from the date of manufacture