EGFR L858R-T790M/BaF3

      EGFR（Epidermal Growth Factor Receptor）是上皮生长因子（EGF）细胞增殖和信号 传导的受体，EGFR 是一种糖蛋白，属于酪氨酸激酶型受体，位于细胞膜表面，靠与配体 结合来激活。EGFR 与肿瘤细胞的增殖、血管生成、肿瘤侵袭、转移及细胞凋亡的抑制有 关。EGFR 基因突变是预测 NSCLC 患者使用 EGFR-TKIs 疗效的重要靶标。

      EGFR 酪氨酸激酶区域的突变主要发生在 18-21 外显子，其中 19 号和 21 号外显子突 变覆盖突变的 90%。EGFR 突变主要包括 4 种类型：外显子 19 缺失突变、外显子 21 点突 变、外显子 18 点突变和外显子 20 插入突变。最常见的 EGFR 突变为外显子 19 缺失突变 和外显子 21 点突变，二者均会导致酪氨酸激酶结构域活化。EGFR 基因突变可以分为两大 类，一个是药物敏感突变，也就是突变后可以使用某种靶向药物（如 19 缺失，L858R 突 变），另一个是耐药突变，即突变后对某种靶向药物耐药（如 T790M 突变）。

      BaF3（小鼠原 B 细胞）的生长和增殖需要 IL-3 的维持。通过引入各种表达激酶的基因， 能作为 BaF3 的驱动基因，让 BaF3 不再依赖 IL-3 而增殖，进而激酶基因成为 BaF3 增殖依 赖的驱动基因，用于评估小分子药物对激酶的靶向抑制作用，原理及流程见下图所示。
 

Figure 1. EGFR[L858R-T790M] BaF3 细胞的构建原理图

Cell Line Name：

EGFR L858R-T790M/BaF3

Host Cell:

Ba/F3

Application:

Anti-proliferation assay and PD assay

Freeze Medium:

90% FBS+10% DMSO

Complete Culture Medium:

Mycoplasma Status:

Negative

1. WB of EGFR-L858R/T790M expression

Lane 1: Negative control
Lane 2: EGFR-WT
Lane 3: EGFR-L858R/T790M
Lane 4: EGFR-L858R/T790M/C797S

Figure 2. WB of  EGFR L858R-T790M/BaF3
 

2. Sanger sequencing

Figure 3. Sanger Sequencing of EGFR-L858R/T790M
 

3. Anti-proliferation assay

Figure 4. CTG proliferation Assay of  EGFR [L858R/T790M]BaF3(C1).